PAS染色顯示細胞中多糖成分.ppt

三、免疫組織化學（immunohistochemistry）
利用抗原（antigen, Ag），抗體（antibody）特異 結合的原理，用已知抗體檢測未知抗原的一種方法。
標記物為熒光素、過氧化物酶或金三、免疫組織化學（immunohistochemistry）
利用抗原（antigen, Ag），抗體（antibody）特異 結合的原理，用已知抗體檢測未知抗原的一種方法。
標記物為熒光素、過氧化物酶或金顆粒
糖原的顯色——PAS反應
材料：
標本：成年小鼠肝和脾石蠟切片
試劑：1%過碘酸，蒸餾水，亞硫酸品紅溶液（Schiff試劑），0.5%偏重亞硫酸鈉，蘇木精，二甲苯，梯度酒精，中性樹膠。
器材：染色缸，燒杯，切片架，蓋玻片等。
方法：
3.過碘酸氧化10分鐘
4.蒸餾水洗3分鐘
5.Schiff試劑避光染色10分鐘
6. 0.5%偏重亞硫酸鈉溶液浸洗3次（I、II、III），
每次2分鐘
7.自來水洗3次，每次1分鐘，蒸餾水洗1分鐘
8.蘇木精染色1分30秒
9.自來水洗3次，每次1分鐘，蒸餾水洗1分鐘
10.梯度脫水：95%酒精 2分鐘→100%酒精 2分鐘，
透明： 二甲苯I 2分鐘→二甲苯II 2分鐘
11.中性樹膠封片，顯微鏡下觀察（低倍鏡→高倍鏡）
*兩人一小組，分別
觀察肝和脾切片
注意事項：
1.從前一個缸放入后一個缸之前，要盡量瀝干水。
2.自來水洗滌方法：將切片架放入洗滌缸中，上下左右晃動洗滌，切不可對著自來水沖洗。
3.嚴格控制好染色、洗滌時間。
結果判斷：
結果：糖原顆粒被Schiff試劑染色呈紫紅色，細胞核被蘇木精染色呈藍色，其他背景呈淡粉紅色。
判斷：根據紫紅色的顏色深淺和分布多少，判斷肝、脾兩份標本的PAS染色程度：－，+，++，+++，++++
實驗報告
1.實驗原理
2.材料與方法
3.結果分析
謝謝!